色譜分析技術(shù)
液相色譜法(HPLC)是以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內(nèi)各成分被分離后,進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè),實(shí)現(xiàn)對(duì)試樣的分析。主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的分析,具體分為定性與定量。
液相色譜法(HPLC)主要可解決如下幾方面的問(wèn)題:不揮發(fā)性化合物分析測(cè)定;極性化合物的分析測(cè)定;熱不穩(wěn)定化合物的分析測(cè)定;大分子量化合物(包括蛋白、多肽、多聚物等)的分析測(cè)定。但是,區(qū)別于液質(zhì)聯(lián)用(LCMS),LCMS一般可以通過(guò)對(duì)物質(zhì)的碎片峰信息進(jìn)行定性或定量,HPLC是通過(guò)物質(zhì)出峰時(shí)間及峰面積來(lái)定性或定量。所以,目前高效液相色譜在環(huán)境領(lǐng)域,主要應(yīng)用于有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)參照情況下,且待測(cè)物質(zhì)純度較高,出峰時(shí)間及峰形不受其余物質(zhì)干擾的定性或定量分析。
氣相色譜法(GC)是利用不同物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相分配系數(shù)的差別,使不同化合物從色譜柱流出的時(shí)間不同,以達(dá)到分離目的。氣相色譜法定性依據(jù)是色譜峰保留時(shí)間,定量依據(jù)是色譜峰高或峰面積。氣相色譜法是定性的有力手段,但是其不足之處在于作為定性依據(jù)的保留時(shí)間窗口是有限的,分離效率再高,保留時(shí)間的測(cè)定再準(zhǔn)確,總避免不了某些化合物在同一色譜柱上保留時(shí)間的相同的可能性。