1. 滴定法
2. 高效液相色譜法
案例一、HPLC法使用Agilent Poroshell 120 Aq-C18色譜柱分離9種有機酸[1]
待測物：草酸、酒石酸、蘋果酸、乳酸、乙酸、馬來酸、檸檬酸、富馬酸、琥珀酸
色譜柱Agilent Poroshell 120 Aq-C18, 4.6×100 mm, 2.7μm
流動相1：0.1%磷酸水溶液/甲醇（97.5%:2.5%）
流動相2：50mM磷酸二氫鈉水溶液（pH2.5）/甲醇（99%:1%）
柱溫：25℃
流速：1.0ml/min
波長：210nm
進樣體積：1μl
色譜柱Waters HSS T3, 4.6×150 mm, 5μm
流動相：20mM磷酸二氫鈉水溶液（pH2.7）
柱溫：35℃
流速：0.5ml/min
波長：210nm
進樣體積：10μl
案例三、HPLC/MS法使用Agilent Hi?Plex色譜柱分離13種有機酸[7]
色譜柱Agilent Hi?Plex, 4.6×250 mm, 8μm
流動相：0.01%甲酸水溶液/乙腈 80:20
柱溫：50℃
流速：0.2ml/min
進樣體積：10μl
檢測器參數(shù)ESI源
干燥氣流速：12L/min
干燥氣溫度：200℃
霧化器壓力：50psi
毛細管電壓：3000V
模式：負離子模式
采集參數(shù)：SIM模式
3. 氣相色譜法（GC）
對于不揮發(fā)的有機酸通常需采用衍生化反應，增加了樣品前處理的復雜程度，同時衍生化過程能否穩(wěn)定的轉化也是影響檢測準確性的關鍵因素。另外傳統(tǒng)的氣相色譜柱的固定相因易與有機酸相互作用，易導致峰拖尾或分離度變差，因此建議選擇超高惰性的色譜柱，可采用直接進樣方式來分離該類化合物，如Agilent DB-624UI。
色譜柱：Agilent J&W DB-624UI，30 m × 0.25 mm，1.4 μm
載氣：氫氣，3ml/min，恒流
柱溫箱：70 °C，保持1 min，然后以20 °C/min 升至260 °C
進樣口溫度：250℃
進樣量：1μl，分流比1：200
FID：260℃
案例二、使用Agilent J&W DB-FFAP色譜柱分離20多種有機酸[11]
色譜柱：Agilent J&W DB-FFAP，30 m × 0.25 mm，0.25μm
載氣：氦氣，42cm/s，恒流
柱溫箱：120 °C，保持2 min，然后以5°C/min 升至140 °C，保持3 min，然后以20°C/min 升至250 °C，保持10min
進樣口溫度：280℃
進樣量：1μl，分流比50:1
FID：280℃
4. 離子色譜法（IC）
離子色譜法分離原理是利用不同待測離子對固定相離子交換能力的差別來實現(xiàn)分離。離子色譜法同樣具備色譜法的重現(xiàn)性和準確性好的優(yōu)點，也能夠?qū)崿F(xiàn)多種組分的分離，且具備較高的靈敏度，同樣適用于有機酸的分離。但離子色譜流動相及淋洗液均為含水體系，雖然某些儀器和色譜柱可耐受一定比例的有機相，但對于水溶性較差的待測物，仍顯示出一定局限性。
典型分析方法案例
案例一、使用：Dionex Ion Pac AS11色譜柱分離13種有機酸[13]
色譜柱：Dionex Ion Pac AS11-HC，4mm × 250 mm
保護?。?/span>Dionex Ion Pac AS11-HC，4mm × 50 mm
流速：1.5ml/min
流動相：KOH淋洗液
檢測器：電導檢測器
進樣量：125μl
梯度洗脫
5. 毛細管電泳法（CE）
毛細管電泳是利用各組分之間的淌度及分配行為的差異實現(xiàn)組分分離，具有分析速度快、分離效率高、實驗成本低、樣品和試劑耗量少、操作簡便等優(yōu)點。但相比于高效液相色譜、氣相色譜等檢測方法，重現(xiàn)性較差、定量分析結果不夠準確。目前該方法廣泛應用于食品行業(yè)或中藥有機酸的分析，化學藥學研究中使用相對較少。
案例一、使用Beckman Coulter P/ACE MQD毛細管電泳系統(tǒng)分離5種有機酸[14]
Beckman Coulter P/ACE MQD毛細管電泳系統(tǒng)
毛細管：Beckman Coulter未涂層50μm×60cm
緩沖溶液：10mmol/L（含0.5mmol/LCTAB）的硼砂作為緩沖液（pH10.5）
分離電壓：-20kV
進樣壓力：1.0psi
進樣時間：10s
波長：214nm
