紫外可見(jiàn)光譜是利用物質(zhì)對(duì)光的選擇性吸收、透射或反射的特性,從而測(cè)定、分析、推斷物質(zhì)的組成、含量及結(jié)構(gòu)。
1、定性分析:判斷共軛關(guān)系及某些官能團(tuán)。比如在(200~400)nm之間無(wú)吸收峰,說(shuō)明該未知物無(wú)共軛關(guān)系,且不會(huì)是醛、酮,很可能是一個(gè)飽和化合物。
2、定量分析:用于測(cè)定物質(zhì)的濃度或含量;
3、異構(gòu)體的判斷。例如:乙酰乙酸乙酯存在酮-烯醇互變異構(gòu)體。酮式?jīng)]有共軛雙鍵,在204nm處有弱吸收;烯醇式有共軛雙鍵,在245nm處有強(qiáng)吸收。故可根據(jù)它們的紫外吸收光譜可判斷其存在與否。
4、純度檢查。例如,如果一化合物在紫外區(qū)沒(méi)有吸收峰,而其中的雜質(zhì)有較強(qiáng)的吸收,就可方便檢出該化全物中的痕量雜質(zhì)
測(cè)試原理
紫外可見(jiàn)近紅外光譜是一種用于物質(zhì)分析和表征的技術(shù),其依賴(lài)于物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)的光的吸收和散射特性。光譜的原理是物質(zhì)能夠?qū)δ承┎ㄩL(zhǎng)的光吸收,因?yàn)檫@些波長(zhǎng)的光可以提供所需的能量以激發(fā)分子的電子軌道。吸收的光的強(qiáng)度作為波長(zhǎng)的函數(shù)測(cè)定,形成一個(gè)光譜。
測(cè)試步驟
以日本Shimadzu UV-3600i Plus為例,一般測(cè)試步驟為:
液體樣品:
打開(kāi)機(jī)器預(yù)熱20min,然后打開(kāi)軟件,設(shè)置好【開(kāi)始波長(zhǎng)】、【結(jié)束波長(zhǎng)】、【數(shù)據(jù)間隔】、【掃描速度】、以及【光度值類(lèi)型】、【狹縫寬度】等參數(shù),在樣品倉(cāng)單元的參比側(cè)和樣品側(cè)分別放入適量空白溶劑用于扣背景進(jìn)行基線校正,校正完成后在樣品側(cè)放入待測(cè)樣品,采集樣品的譜圖。
粉末樣品:
打開(kāi)機(jī)器預(yù)熱20min,然后打開(kāi)軟件,設(shè)置好【開(kāi)始波長(zhǎng)】、【結(jié)束波長(zhǎng)】、【數(shù)據(jù)間隔】、【掃描速度】、以及【光度值類(lèi)型】、【狹縫寬度】等參數(shù),利用硫酸鋇標(biāo)準(zhǔn)白板進(jìn)行基線掃描,校正完成后在樣品側(cè)放入待測(cè)樣品,采集樣品的譜圖。
塊體/薄膜樣品:
先設(shè)置好【開(kāi)始波長(zhǎng)】、【結(jié)束波長(zhǎng)】、【數(shù)據(jù)間隔】、【掃描速度】、以及【光度值類(lèi)型】、【狹縫寬度】等參數(shù),利用硫酸鋇標(biāo)準(zhǔn)白板進(jìn)行基線掃描后,在樣品側(cè)用夾具固定住樣品,注意將測(cè)試面對(duì)準(zhǔn)積分球樣品窗口,采集樣品的譜圖。